Ответы

  1. Общие Колиформные Бактерии
    ОКБ — ГРАМ » — «, ОКСИДАЗАОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ, СПОР НЕ ОБРАЗУЮТ, СПОСОБНЫ РАСТИ НА СРЕДАХ С ЛАКТОЗОЙ (ЭНДО, ЛЕВИНА) И ФЕРМЕНТИРОВАТЬ ЛАКТОЗУ В ТЕЧЕНИЕ СУТОК ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ 37 ГРАДУСОВ.

    ЕСТЬ ЕЩЁ ТЕРМОТОЛЕРАНТНЫЕ КОЛИФОРМНЫЕ БАКТЕРИИ (ТКБ) — ОНИ ВХОДЯТ В СОСТАВ ОКБ, НО ЕДИНСТВЕННОЕ, ЧЕМ ОНИ ОТ Их ОТЛИЧАЮТСЯ — ФЕРМЕНТИРУЮТ ЛАКТОЗУ ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ 44 ГРАДУСА.

    Способ мембранной фильтрации (через мембранный фильтр с следующим выращиванием посевов на дифференциальной среде с лактозой (Эндо) и идентификацией по морфологическим, культуральным, биохим свойствам для обнаружения колиморфных микробов).
    Способ МЕМБРАННОЙ ФИЛЬТРАЦИИ:
    З ОБЪЁМА ВОДЫ ПО 100 МЛ ФИЛЬТРУЮТ ЧЕРЕЗ МЕМБРАННЫЕ ФИЛЬТРЫ.
    Потом ЭТИ ФИЛЬТРЫ ПОМЕЩАЮТ НА СРЕДУ ЭНДО (СОСТАВ — АГАР, ОБЕСЦВЕЧЕННЫЙ ЩЁЛОЧЬЮ, И ЛАКТОЗА; ИНДИКАТОР — ФУКСИН).
    Чашечку В ТЕРМОСТАТ – ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ 37 ГРАДУСОВ НА День.
    УЧЁТ…
    НА ДАННОЙ Чашечки ПЕТРИ (Видите ли) ВЫРОСЛИ 2 ИЗОЛИРОВАННЫЕ ЛАКТОЗОПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОЛОНИИ — Красные, ВИШНЁВЫЕ С Железным БЛЕСКОМ.
    (ПРИМЕЧАНИЕ — Если б ОНИ БЫЛИ ЛАКТОЗООТРИЦАТЕЛЬНЫЕ — ТО КОЛОНИИ Могли быть Тусклые)

    Далее ОПРЕДЕЛЯЕМ:
    -НАЛИЧИЕ Либо ОТСУТСТВИЕ ОКСИДАЗЫ — ПОЛОСКУ ФИЛЬТРОВАЛЬНОЙ БУМАГИ, СМОЧЕННУЮ РЕАКТИВОМ ПОМЕЩАЮТ В Чашечку ПЕТРИ, МАТЕРИАЛ ИЗ КОЛОНИИ ШТРИХОМ НАНОСЯТ НА ЭТУ ПОЛОСКУ, ЕСЛИ В ТЕЧЕНИЕ Минутки ЦВЕТ С Начального (ВИШНЕВОГО) ИЗМЕНЕТСЯ НА Голубий — Означает — ЛАКТОЗОПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ. У НАС Вышли ЛАКТОЗООТРИЦАТЕЛЬНЫЕ (ЦВЕТ НЕ Изменялся)
    -КАКИЕ ОНИ ПО ГРАМУ — ИЗ КОЛОНИИ МАЗОК, ОКРАШИВАЕМ ПО ГРАМУ. КОЛИФОРМНЫЕ БАКТЕРИИ — ГРАМ » -«

    -ДАЛЬШЕ Нужно Найти ОБЩИЕ ОКБ Либо ТЕРМОТОЛЕРАНТНЫЕ ТКБ ЭТО
    ДВЕ ПРОБИРКИ СО СРЕДОЙ ГИССА (УГЛЕВОД — ЛАКТОЗА) -В Их ДЕЛАЕМ ПОСЕВ С КОЛОНИИ, ОДНУ ИНКУБИРУЕМ ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ 37,ДРУГУЮ ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ 44. ГДЕ ПРОИЗОШЛА ФЕРМЕНТАЦИЯ ЛАКТОЗЫ (ДО КИСЛОТЫ И ГАЗА) — ТАКИЕ И БАКТЕРИИ, ЕСЛИ ПРИ 37 ГРАДУСАХ — ОКБ, ЕСЛИ ПРИ 44 — ТКБ… У НАС БЫЛИ ОКБ
    ОКБ (37⁰С – 48 ч);
    ТКБ (44⁰С – 24ч) – кислота и газ.
    ВЫВОДЫ
    Определяем принадлежность к колиморфным микробам:
    1.Лактазопозитивные (т. к. среда красноватая)
    2.В мазке – Грам- палочки
    3.Проба на оксидазу: фильтровальная бумага смочена реактивом (1% р-р фенилендиаминового соединения), на неё наносят материал из колонии.
    Реакция + -после 1 мин синеет
    Реакция -…- цвет не изменяется — КАК И ДОЛЖНО БЫТЬ В НАШЕМ ОПЫТЕ

    Позже ПОДСЧИТЫВАЮТ ОКБ И ТКБ В 100 МЛ ВОДЫ

    РАСЧЁТ
    Х = (А х 100) / V, А – число колоний, V – профильтрованный объём воды
    (2 х 100) / 300 = 0,7
    ОКБ = 0,7 КОЕ / 100 мл
    (КОЕ – КОЛОНИЕОБРАЗУЮЩИЕ ЕДИНИЦЫ, У НАС – 2 КОЛОНИИ)

    ФОРМУЛА ОКБ =2*100/300 (ЭТО Сходу ПРИМЕНИТЕЛЬНО К НАШЕЙ Чашечке ПЕТРИ)
    2 — ЧИСЛО ВЫРОСШИХ КОЛОНИЙ
    100 И 300 ОБЪЁМЫ

    ВЫВОДЫ
    ПОЛУЧАЕМ 0,7 КОЕ/100 МЛ — В НОРМЕ В ВОДЕ НЕ ДОЛЖНО БЫТЬ ОКБ И ТКБ.

Leave a comment

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *